方法一：看刚蜕的皮
捕鸟蛛性别判断公认的最准确的方法就是将蜘蛛蜕下来的皮展开，在书肺中间有精囊的就是母蛛，没有就是公蛛。但是由于不同属，不同品种间的精囊都长得不都一样，特殊情况还需特别对待，可以说你观察的越多，积累的经验越多，看的也越准确。
操作：趁蜘蛛刚蜕好皮还没干的时候把皮从蜘蛛身边拿出来，把尾部的皮撑开，就能看到下图圈中的差别。
下图为公蛛

母蛛

方法二：看腹部
通常来说公蛛腹部书肺之间只有一条线，，母蛛精囊的位置有小的开口
操作：用手的拇指和中指握住蜘蛛前两对步足与后两对步足之间，食指抵住背甲以防蜘蛛翻身攻击到你，如果你的蜘蛛是金属蓝或者海捕等比较凶的种类的话，不要用手抓，把它赶到玻璃杯，用东西盖住杯口，从杯外观察蜘蛛的腹部。你会看到下面的区别。
注：如果没有十足的把握，还是老老实实的通过玻璃杯或其他器皿观察！！！
左母右公

墨西哥红膝头 公

华丽花边雨林，左母右公

左母右公

很明显母蛛腹部书肺间有开口，而公蛛没有。公蛛因为没有储精袋，所以书肺看上去很明显感觉比较大。
以上两种方法都要求蜘蛛有一定的体型（地栖至少5cm足展，树栖品种可能8－10cm足展），因为蜘蛛过小的话很难看清精囊的情况，即使是看蜕皮也会因太小很难辨认。
方法三：从胫节刺以及精拳区分
此方法只适用于成体。
观察蜘蛛的第一步足以及须肢，如果是公蛛，你会发现它的第一步足的胫节上会长出一对胫节刺（图中为1）须肢会膨化，并出现一个钩，这就是所谓的精拳了（图中为2）。没有就是母的。
其他：新加坡蓝足展达15cm，还是非常蓝，那么可以基本肯定是母蛛了，因为这个品种公蛛成体基本不可能超过15cm，很多公新加坡蓝在9－12cm的时候就已经是成体然后彻底变色了。公蛛在成体前和母蛛看上去一样，然后成体后突然变色这种现象在新加坡蓝所在的属里面是普遍现象，其他一些品种如千里达老虎尾，巴拿马黄金和委内瑞拉太阳虎所在的那个属也是这种情况。
挑选母蛛：通过比较一些部位来挑选到相对母蛛概率较大的蜘蛛（甚至幼体），但是不可能100％准确。比如说在挑选华丽雨林的时候，像印度华丽雨林，沙连华丽雨林，彼得森华丽雨林等蜘蛛时，如果能够比较的话尽量挑选较白的个体，这样母蛛的概率会高很多。一些地栖的蜘蛛可以通过比较敖肢（牙齿）的大小来挑选，敖肢大而阔且长的母蛛概率高，相反敖肢小而窄并且短的蜘蛛公蛛概率高。当蜘蛛有了一定体型后，腹部呈倒梨型的蜘蛛母蛛概率较大，而公蛛腹部呈栗子型的较多