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酶切琼脂糖电泳
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用来表达人粒细胞集落刺激因子c csf的实验菌与具有kana抗性的阳性菌,接种于具有抗生素的培养基上,培养一夜。
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2017-05-26 23:44
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实验菌长出菌落,说明表达载体 带走目的基因的质粒 已经转化成功
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阳性菌一号二号三号四号五号,进行pcr,产物进行琼脂糖凝胶电泳,明显3号与5号条带更亮,说明转化效果更好,所需的目的基因拷贝数很多。可能在下面表达目的蛋白是时,产量会很好。
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2017-05-26 23:49
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六号阳性对照,七号阴性对照
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2017-05-26 23:50
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三号与五号菌液扩大培养,加入诱导剂IPTC诱导表达,宿主细胞是大肠埃希菌,内含有乳糖操纵子,IPTC属于半乳糖,诱导细胞表达。过夜培养
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12楼
2017-05-26 23:53
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产物SDS PAGE 电泳,目的蛋白为G CSF,分子量为19.6kd.marker条带不清晰,电泳脱色效果不好,是因为上样缓冲液loading buffer于商家购买,效果没有人工配置的好,导致电泳拖尾,辩识不清晰。清晰,电泳脱色效果不好,是因为上样缓冲液loading buffer于商家购买,效果没有人工配置的好,导致电泳拖尾,辩识不清晰。
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16楼
2017-05-27 00:00
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2017-05-27 00:01
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发酵实验。运用地衣芽孢杆菌生产蛋白酶。
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图为发酵设备。一开始的地衣芽孢杆菌种子液于显微镜观察,形态呈杆状。加入发酵液后四小时第二次镜检,有破碎且菌体数目少,怀疑噬菌体污染或者培养时间短。八小时第二次镜检,细菌已经难以于视野中寻找,承认发酵液被噬菌体污染,菌体溶解。菌体生长速度低于溶解速度。
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19楼
2017-05-27 00:07
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