根据实验要求，自己随机设计的模板序列，比较短，40nt，去年一直都能跑出来标准曲线，但是今年跑的效果一直都不好，PCR孔终浓度10fm，1fm以及背景都集中在24-25左右，已经排除了试剂污染，气溶胶污染，真的要崩溃了，实在找不到原因了，请路过的大神帮帮忙。
如果实在不行，换个思路，有哪位大佬有关于40-50的扩增效果比较好的模板序的也行
跪求#pcr#