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银杏内酯检测方法

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银杏内酯是从银杏树的叶片中提取出来的,是由倍半萜内酯和二萜内酯组成的萜类化合物。它的具体成分还包括了白果内酯,银杏内酯a,银杏内酯b,银杏内酯c等。白果内酯属于倍半萜内酯。这些化合物有独特的分子结构,拥有12碳骨架,包含一个叔丁基和六个五元环。它具有多种生物活性,具有抗氧化,抗炎,促进血液循环等作用。

检测样品中银杏内酯含量的方法,包括高效液相色谱(HPLC)法、液相色谱-质谱联用(LC-MS)、液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法等。
银杏内酯的提取方法有:溶剂萃取法、柱提取法、溶剂萃取-柱提取法。其中,溶剂法比较常用,也相对简单。比如,将样品磨成粉,过筛,精密称量,用甲醇溶解,蒸干后水溶,后面用醋酸乙酯提取,过滤,待测。提取很重要,但色谱条件是检测的关键。

色谱条件:使用常规的C18色谱柱,长250mm,内径4.6mm,粒径5um,柱温30-35℃;以甲醇-四氢呋喃-水或正丙醇-四氢呋喃-水为流动相,流速为1ml/min;紫外检测器或蒸发光散射检测器,进样量5-10uL。
标准曲线:对照品(银杏内酯A、B、C和白果内酯),精密称量适当的对照品,分别放在容量瓶中,用甲醇溶解。根据信噪比的5-10倍,确定最低的浓度点。成倍的,梯度稀释5-7个浓度点并记录。上hplc测定对应的色谱峰,手动或自动积分,结合对应的对照品浓度,在办公软件中根据函数描点划线形成标准曲线,得到回归方程,相关系数r2大于0.999。也可以做方法学验证。
样品含量计算:使用有效的色谱条件,对样品进行测定,出来色谱峰的面积,进行积分处理。将峰面积代入到回归方程,是可以计算出样品中对应的银杏内酯含量。

质谱法,是在液相的基础上,将化合物打碎成离子碎片,根据质荷比(m/z)形成一个一个的质谱峰。使用标准曲线,计算含量。


IP属地:上海1楼2025-03-06 16:57回复