DCAF7通过抑制G3BP1的K48链多泛素化来稳定G3BP1蛋白
1. 筛选DCAF7的互作蛋白G3BP1
步骤：
IP-MS分析：为了探索DCAF7在鼻咽癌（NPC）进展中的作用，进行免疫沉淀-质谱（IP-MS）分析，筛选出DCAF7的潜在互作蛋白（图1a）。
生物信息学分析：通过STRING数据库和Cytoscape MCODE分析，发现G3BP1位于排名最高的蛋白簇中心（图1b）。G3BP1是一种应激颗粒（SG）组装因子，在癌症进展中起重要作用。
Co-IP验证：外源性和内源性Co-IP实验证实了DCAF7与G3BP1的相互作用（图1c）。
小贴士： IP-MS是筛选互作蛋白的利器🎯，咱们专注互作机制研究，如有需要欢迎详聊哦。
2. DCAF7抑制G3BP1蛋白的降解
步骤：
敲低和过表达实验：敲低DCAF7显著降低了G3BP1蛋白水平，而过表达DCAF7则提高了G3BP1蛋白水平（图1d-e）。
mRNA水平检测：G3BP1的mRNA水平并未随DCAF7的敲低或过表达而显著变化（图1f-g），说明DCAF7调控G3BP1发生在蛋白质水平。
半衰期实验：环己亚胺（CHX）处理实验显示，DCAF7延长了G3BP1蛋白的半衰期（图1h），表明DCAF7抑制G3BP1的降解。
3. DCAF7通过泛素-蛋白酶体途径调控G3BP1降解
步骤：
抑制剂实验：使用蛋白酶体抑制剂（MG132）或溶酶体抑制剂（氯喹：CQ）处理细胞，发现MG132逆转了DCAF7敲低导致的G3BP1蛋白水平下降（图1i-j），说明G3BP1的降解依赖于泛素-蛋白酶体途径。
泛素化检测：Co-IP实验显示，DCAF7敲低显著增加了G3BP1的K48链多泛素化（图1k），表明DCAF7通过抑制K48链多泛素化来稳定G3BP1。
总结： 这项研究揭示了DCAF7通过抑制G3BP1的K48链多泛素化来稳定G3BP1蛋白。🌟
如有互作机制相关科研问题，欢迎留言探讨。