相比起伊丽莎白出生时的遭人厌弃,玛丽斯图亚特的降生则对于苏格兰和斯图亚特家族来说都是一件幸事。1542年12月8日,在她父亲詹姆士五世去世前六天,玛丽斯图亚特出生了。在这之前,詹姆士五世一直没有一位合法的继承人,按理说,女儿的出生应该让他兴奋。然而当奄奄一息的国王听说王后生了一位女继承人时,他说:“我们的王位由女人而得,也必将终于女人。”尽管如此,这个尚在襁褓中的女婴还是成为了苏格兰女王。而且,由于祖母玛格丽特王后是亨利八世姐姐的缘故,玛丽斯图亚特也成为了英国王位的第四号继承人。
一个是遭人厌弃的私生女,3岁便失去了母亲的庇护,在险象环生的宫廷里如履薄冰,随时都有性命之虞。一个是血统纯正的继承人,生下来6天便成为了女王,同时对另一顶王冠享有合法的继承权。伊丽莎白的人生似乎黯淡无光,而在玛丽斯图亚特的前方,幸运女神似乎正在向她招手。两位皇家公主的差距从生下来就注定了。
1543年,伊丽莎白的处境有所好转。在最后一位继母凯瑟琳帕尔的斡旋下,伊丽莎白和异母姐姐玛丽回到了宫廷。同年,亨利八世在国会通过了王位继承法,宣布在王储爱德华之后,玛丽和伊丽莎白依次享有王位继承权。
不过政治向来都是实力的博弈,一纸轻飘飘的文书永远也无法给予当事人足够的保证。1543年的王位继承法虽然赋予了伊丽莎白第三顺位的王位继承权,但并没有承认她是亨利八世的婚生女儿。也就是说,伊丽莎白出身上的硬伤仍然没有得到必要的修正。
在伊丽莎白得到王位继承权的同时,玛丽斯图亚特也迎来了她的第一次婚姻谈判,对方是伊丽莎白的异母弟弟、未来的英国国王爱德华六世。当苏格兰贵族将拟定的订婚条约拿给摄政的王太后时,玛丽德吉斯敏锐地发现了条约中的一处纰漏,“苏格兰方面必须保证,将女王迅速送往伦敦”。玛丽德吉斯有充分理由相信,亨利八世会采用非常手段将女儿致死,从而早点接收苏格兰的遗产。而且,这位出身法国名门贵族的王太后对信仰新教的英格兰早有不满。一旦女儿与新教王子订婚,势必将改变苏格兰的宗教环境,同时将影响苏格兰与法国的传统联盟。于是,她拒绝了和英国的订婚,转而向法国寻求援助。英法之间为争夺小女孩的外交战终于酿成了1547年英国对苏格兰的一场战争。英军长驱直入,玛丽德吉斯决定将女儿送往法国,与法国王储订婚。
就这样,1548年,不满6岁的玛丽斯图亚特来到了法国,成为了欧洲最有权势的一位王太子的未婚妻。相比之下,伊丽莎白6岁时连王位继承权也没有。就在玛丽斯图亚特成为法国王储的未婚妻的这一年,15岁的伊丽莎白遭遇到人生第一次危机。